歐曼生物IPTG 【367-93-1】 科研用途介紹

大家都知道IPTG【CAS:367-93-1】在生物實驗室的用途非常廣泛，那麽這個在生化研究領域，這個人人知曉的IPTG到底有哪些用途呢？下面小編為大家介紹下吧！
1.IPTG主要用作誘導劑，誘導蛋白表達，誘導乳糖操縱子表達。
2.IPTG通常和X-GAL【CAS：7240-90-6】一起搭配使用，用於藍白菌落的篩選。
3.IPTG也用在發酵提取，細胞培養中。
4.IPTG還可以用在疫苗研發、大腸桿菌表達目標蛋白、細胞重組表達等研究中。

IPTG誘導原理
首先
E. coli的乳糖操縱子（元）含Z、Y及A三個結構基因，分別編碼半乳糖苷酶、滲透酶和乙酰基轉移酶，此外還有一個操縱序列O、一個啟動序列P及一個調節 基因I。I基因編碼一種阻遏蛋白，後者與O序列結合，使操縱子（元）受阻遏而處於關閉狀態。在啟動序列P上遊還有一個分解（代謝）物基因激 活蛋白（CAP）結合位點。由P序列、O序列和CAP結合位點共同構成lac操縱子的調控區，三個酶的編碼基因即由同一調控區調節，實現基因產物的協調表達 。
其次
在沒有乳糖存在時，lac操縱子（元）處於阻遏狀態。此時，I序列在PI啟動序列操縱下表達的Lac阻遏蛋白與O序列結合，阻礙RNA聚合酶與P序列結合，抑制轉錄啟動。當有乳糖存在時，lac操縱子（元）即可被誘導。在這個操縱子（元）體系中，真正的誘導劑並非乳糖本身。乳糖進入細胞，經β-半乳糖苷酶催化，轉變為異乳糖。後者作為一種誘導劑分子結合阻遏蛋白，使蛋白構象變化，導致阻遏蛋白與O序列解離、發生轉錄。異丙基硫代半乳糖苷（IPTG）的作用與異乳糖相同，是一 種作用極強的誘導劑，不被細菌代謝而十分穩定，因此被實驗室廣泛應用

使用方法
首先把IPTG配制成23.83 mg/ml（100 mM）的水溶液，並進行過濾除菌後保存。然後在100 ml的瓊脂培養基中，加入100 μl的上述溶液、200 μl的X-Gal（20 mg/ml的二甲基甲酰胺（DMF）溶液）和100 μl的Amp（100 mg/ml），制作成IPTG、X-Gal、Amp平板培養基。當DNA片段插入至pUC系列載體（或其他帶有lacZ、Amp基因載體），然後轉化至lacZ缺失細胞中後，塗布上述的IPTG、X–Gal、Amp平板培養基，可根據長出菌體的藍白色，而方便地挑選出基因重組體（白色為具有DNA插入片段的基因重組體）。
 
作用
誘導外源基因的表達，普遍應用於原核表達系統，使其表達量增高，產物穩定，具有易鑒定，易純化的優點。
 
匯百試劑作為國內大型糖苷系列產品生產商，向廣大科研單位供應純度99%~101%的高純度IPTG。經多次會議商討改良，匯百試劑目前完成IPTG【367-93-1】進一步技術純化。目前匯百試劑IPTG擁有工業級，試劑級，醫用級三個級別。
 
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